Biotechnol. Das IgG/IgM Bb Hybrid war stark positiv, ein positives Patientenserum (IgM pos. Heutzutage können chimäre Antikörper aus einer Vielzahl verschiedener Wirte erstellt werden. und dann bei 4.000g für 10min. Ein chimärer Antikörper, der ein solches Verbindungsmoleküle enthält, ist daher bevorzugt. Obwohl die zweite Gruppe vorwiegend auf den amerikanischen Kontinent beschränkt ist und die durch sie verursachten Endomykosen in Europa relativ selten vorkommen, finden sie in letzter Zeit wegen des intensiveren Fernreiseverkehrs verstärkt Beachtung.
[0037] Zur Differenzierung von beispielsweise latenten Candida-Infektionen (transiente Fungämie) von manifesten Candida-Mykosen, ist der Verlauf der IgM-Antikörper im indirekten Immunfluoreszenztest bedeutsam.
[0038] Bei Aspergillus-Infektionen ist der Nachweis von entsprechenden Antikörpern in Präzipiationsreaktionen von Bedeutung.
In den meisten Fällen steht zu wenig oder gar kein als positives Kontrollserum geeignetes Patientenserum zur Verfügung, insbesondere bei akuten Infektionsereignissen, sodaß zu Kontrollzwecken nicht auf Patientenseren zurückgegriffen werden kann.
[0043] Ein weiterer Nachteil bei den bisher benutzen und verfügbaren Verfahren ist die relative Instabilität der für die immundiagnostischen Tests zu verwendeten Antikörper bzw.
Ein Manko der häufig genutzten Antikörper aus Mäusen in der Therapie-Anwendung beim Menschen ist die ungewollte Immunantwort, die auf Grund geringer struktureller Unterschiede zwischen humanen und murinen Antikörpern auftritt. Chem. Dies dürfte insbesondere dann von Bedeutung sein, wenn bei der ersten klinischen Manifestationen die Erreger entweder nur kurzfristig oder gar nicht mehr nachweisbar, okkult oder inapparent sind oder die dafür notwendigen Verfahren sich technisch als sehr schwierig oder differentialdiagnostisch als problematisch erweisen.
Die Spirochaeten wurden bei 5.000g abzentrifugiert, 2 Mal in PBS (Phosphat gepuffertes Kochsalz) gewaschen und in 0,5ml PBS resuspendiert.
1.3. Insbesondere von solchen diagnostisch wertvollen Resultaten, die auf der Grundlage des Nachweises von Immunglobulinen bzw. Microbiol. beschrieben. 4:
Mitumfaßt sind auch über die bekannten Methoden der DNA-Rekombination hergestellten Antigene, beispielsweise wie sie für Toxoplasma gondii in der EP-A 0431541 beschrieben sind, und über die bekannten synthetischen und semisynthetischen Verfahren herstellbaren Antigene. Im allgemeinen kann davon ausgegangen werden, daß beispielsweise bei der Immunisierung eines ausgewachsenen Kaninchens eine Gesamtdosis von 0.1 - 5.0 mg Bakterien in Suspension intraperitoneal oder intravenös in einem Volumen von jeweils 0.5 bis 2.0 ml pro Injektion gegeben wird, wobei jede Einzeldosis 0.01 bis 0.1 mg an Bakterienmasse enthalten kann.
semisynthetisch hergestellt sein kann, oder Teilen davon, immunisiert werden und aus den danach gewonnenen Seren bzw. In: Nature. Daher ist auch die Verwendung eines solchen chimären Antikörpers gemäß der Formel Y1[IgG]-Z-Y2[IgM] für die serologisch-immunologische Diagnostik im oben beschriebenen Sinn ganz besonders bevorzugt.
[0083] Die Bereitstellung der erfindungsgemäßen chimären Antikörper kann aber auch dadurch erfolgen, daß, wie oben schon erwähnt, eine direkte kovalente Bindung Z gemäß der allgemeinen Formel Y1-Z-Y2 gewählt werden kann.
Fab Fragmente können erhalten werden, indem beispielsweise die Disulfidbrücken des betreffenden F(ab')2 Fragments reduziert werden und Fab Fragmente können gewonnen werden beispielsweise durch Behandlung der Antikörpermoleküle mit Papain und gegebenenfalls einem Reduktionsmittel. 189, 73 - 78, 1985).
[0036] Bei Endomykosen, die synonym u.a.
beschrieben) wurde vorgenommen. Blutproben die gewünschten polyklonalen Antikörper nach an sich bekannten Methoden gewonnen und gereinigt werden. Biochem. 3:
So ist es bei Toxoplasma-Infektionen unmöglich, die Erreger direkt nachzuweisen, sodaß in solchen Fällen der serologisch-immunologischen Diagnostik eine entscheidende Bedeutung zukommt.
[0035] Insbesondere kommt den quantitativen Enzymimmunoassays auf spezifisches IgG und IgM eine wichtige Funktion zu und wegen seiner diagnostischen Sensitivität und Spezifität ist der Enzymimmunoassay auf spezifisches IgM anderen Testsystemen (z.B.
zum Ausschluß von falsch-negativen Ergebnissen bei beliebigen Diagnoseassays, die zum Zweck eines Antikörpernachweises angewandt werden, besonders geeignet sind. cit.; Katalog von Pierce).
Beispielsweise kann die Herstellung eines erfindungsgemäßen chimären Antikörpers durch kovalente Bindung zwischen Y1 und Y2, wobei dafür IgX steht und X die oben genannte Bedeutung hat, gemäß der allgemeinen Formel Y1-X-Y2 mit der genannten Definition von Z dadurch erfolgen, daß geeignete Immunglobuline nach an sich bekannter Methode gewonnen und gereinigt werden.
Die Spezifität solch eines Antikörpers liegt grundsätzlich in den hypervariablen Regionen der variablen Domäne. So wird es allgemein als großer Nachteil beschrieben, daß nur sehr begrenzt Referenzpräparationen zur Verfügung stehen, die eine Kontrolle und ein Vergleich der erhaltenen Resultate, insbesondere zwischen verschiedenen Laboratorien, schwierig oder unmöglich gestalten und eher zur Konfusion beitragen (MALVANO, R.
et al., In: Methods of enzymatic analysis, Bergmeyer, H. U., ed., VCH Verlagsgesellschaft, Weinheim, 1986, S. 2 - 10)
[0042] Als ein jedoch sehr gravierender Nachteil bei allen bisher bekannten Verfahren zur Immundiagnostik stellt sich häufig das Fehlen eines Kontrollserums oder eines spezifischen standardisierten Produkts (IgX - Kontrolle) heraus.
IgM-Plasmozytom, von dem bekannt ist, daß das Blut eines solchen Menschen eine IgM-Konzentration bis zu 100 mg/ml haben kann, das in seinem Blut enthaltene IgM nach Standardmethoden oder beispielsweise über Plasmapherese gewonnen werden.
[0086] Die Reinigung des nicht-humanen und des humanen Immunglobulins kann nach den bekannten Verfahren der Salzfällung (beispielsweise mit Ammoniumsulfat) oder der Chromatographie, beispielsweise über Anion-Austauscher (beispielsweise DEAE-DE52, Serva) oder Gel-Chromatographie (beispielsweise Sephacryl, Pharmacia) erfolgen.
[0087] Hinsichtlich des der vorliegenden Erfindung zugrundeliegenden Begriffs Immunogen bzw.
Unsere innovative Plattform ermöglicht die präzise Entwicklung und Produktion chimärer Antikörper mit beispielloser Spezifität und Wirksamkeit. Hinsichtlich der in dieser Arbeit offenbarten chimären Antikörper werden ausschließlich solche beschrieben, die eine Kombination muriner VDJ Regionen der schweren Kette und VD Regionen der leichten Kette mit Humanen H und L konstanten Ketten umfassen.
12 (2): 188–94.doi:10.1016/S0958-1669(00)00198-1. solche darstellen.